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知识中心无菌平皿培养基 无菌检测用培养基主要有哪里类
2021-07-12 22:28:58
来源：朵拉利品网
2, 无菌检查法的培养基的制备及培养条件
培养基应适合需气菌、厌气菌或真菌的生长，可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。以下培养基制备时，均以115℃灭菌30分钟。1.需气菌、厌气菌培养基（硫乙醇酸盐流体培养基）酪胨（胰酶水解） 15g 氯化钠 2.5g葡萄糖 5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0mlL-胱氨酸 0.5g （或新配制的0.2%亚甲蓝溶液0.5ml）硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.5~0.7g（或硫乙醇酸0.3ml） 水 1000ml酵母浸出粉 5g除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH值使灭菌后为7.1±0.2，分装，灭菌。在供试品接种前， 培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5，否则，须经水浴煮沸加热， 只限加热一次。
15ml左右。细菌培养，平皿中培养基要求完全覆盖皿底，厚度2-3mm，直径90mm的平皿，半径4.5cm，厚度2-3mm，需要的培养基体积V=3.15*4.5*4.5*0.2（或0.3）=12.7ml（或19.1ml），因此需要15ml左右，具体厚度需要根据实验要求酌情增加培养基的倒入量。倒平板的时候不宜过厚，过厚移菌不好移，容易粘在打孔器上，而其移到下一个培养基上培养条件不同，原培养基太多的话，不利菌适应新的环境，过薄则不利于微生物生长。培养基配制原则1、选择适宜的营养物质总体而言，所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源，但由于微生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求是不一样的，因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。2、营养物质浓度及配比合适培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。3、控制pH条件培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。 4、控制氧化还原电位不同类型微生物生长对氧化还原电位（F）的要求不一样，一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长，一般以+0.3一+0.4V为宜，厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长，兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸，在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关，也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下，可通过增加通气量（如振荡培养、搅拌）提高培养基的氧分压，或加入氧化剂，从而增加F值；在培养基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。5、原料来源的选择在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分，特别是在发酵工业中，培养基用量很大，利用低成本的原料更体现出其经济价值。另外，大量的农副产品或制品，如鼓皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用的发酵工业原料。6、灭菌处理要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在配制培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。参考资料来源：百度百科——平板培养基百度百科——培养基
名词解释
培养基
培养基是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
灭菌
灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求，采用不同的方法，如培养基灭菌一般采用湿热灭菌，空气则采用过滤除菌。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。
无菌
指没有活菌的意思，又是生物技术中的一个重要概念。只有在培养基、发酵设备等处于无菌的前提下，微生物接种后，才能实现纯种培养，最终得到所需的产品。 防止微生物进入机体或物体的方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生物学实验、外科手术、换药、注射时，均需严格遵守无菌操作规定。
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