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he染色步骤及每步原理 HE染色的方法步骤及注意事项
2021-04-13 03:10:42 来源:朵拉利品网

2, he染色的操作步骤是什么?



he染色的操作步骤:
1. 将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1~2h;
2. 石蜡切片常规二甲苯,2113乙醇脱蜡至水,
3. 苏木素染10分钟,
4. 流水冲洗,去余5261色,
5. 0.7%盐酸乙醇分化数秒钟,4102
6. 流水冲洗,切片变蓝约15分钟,
7. 7.95%乙醇30秒钟,
8. 8.酒精性伊红染30秒,
9. I 95%乙醇30秒钟,
10. II 95%乙醇30秒钟,
11. I 100%乙醇30秒钟,
12. II100%乙醇30秒钟,
13. 石碳酸二甲苯30秒钟,(16531: 4石碳酸1-二甲苯4)
14. I二甲苯30秒钟,
15. II二甲苯30秒钟,
16. 中性树胶封片。
HE染色,即是苏木内精-伊红染色法,是形态学最常用的染色方法,在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中容的成分着红色。

3, he染色的基本原理是什么?嗜酸性?嗜碱性?



he染色易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。
苏木精 - 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

名词解释


30

30(三十)是29与31之间的自然数、正整数,是一个偶数,也是一个有理数。30=2*3*5。

乙醇

乙醇(ethanol,结构简式CH3CH2OH或C2H6O)是醇类的一种,有机化合物,俗称酒精,是最常见的一元醇。 其在常温常压下是一种易燃、易挥发,且具有特殊香味(略带刺激)的无色透明液体,是常用的燃料、溶剂和消毒剂,也用于有机合成。乙醇与甲醚是同分异构体。