5x蛋白电泳缓冲液配方 跑蛋白电泳时的电极缓冲液怎么配

2020-12-04 07:48:46 来源：朵拉利品网

1, 跑蛋白电泳时的电极缓冲液怎么配

所用试剂：Tris碱，甘氨酸和SDS
含量配方：30.3Tris碱，188g甘氨酸，10gSDS，此产品为干粉混合物。用时可以用双蒸水溶解成1L，配成10倍浓缩液，用时再稀释10倍，配好的电泳液用于SDS-PAGE蛋白电泳，可反复使用三到五次，如果发现有明显沉淀或者漂浮时，请丢弃换新的。
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成， 是电泳场中的导体，也是维持电泳系统恒定pH值的必要条件，成分及其离子强度影响物质的电泳迁移率，应避免与被分离的样品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。
电泳缓冲液中的EDTA可螯合Mg离子等二价阳离子，防止电泳时激活DNA酶及Mg离子与核酸生成沉淀。
注意事项：
1、所有试剂、溶液以及样品的包装上必须要有标签。标签要完整、清晰，表明试剂的名称、规格、质量。
2、溶液除了表明品名外，还应表明浓度、配置日期等。万一标签脱落，应照原样贴牢。决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。
3、无标签的试剂必须取小样检定后才可使用。不能使用的化学试剂要慎重处理，不能随意乱倒。为了保证试剂不受污染，应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂，绝不可以用手抓取。若试剂结块，可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。
4、液体试剂可用洗干净的量筒到取，不要用吸管伸入原试剂中吸取液体。从试剂瓶中取出的、没有用完的声誉药品，不可再倒回原瓶。
5、为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考资料来源：搜狗百科-电泳缓冲液
参考资料来源：搜狗百科-聚丙烯酰胺凝胶电泳

2, 寻, 6X蛋白电泳缓冲液配方,含DTT的。

4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样。
4*上样缓冲液使用方法：
1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例（4倍稀释）来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
5*上样缓冲液使用方法：
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液（5X）。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液（5X）的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液（5X）。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

名词解释

电泳

电泳（electrophoresis）是指带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。 它是由俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯（FerdinandFrederic Reuss）于1807年最早发现的现象，已广泛用于分析化学、临床化学、药理学和免疫学等领域。

试剂

试剂（reagent），又称生物化学试剂或试药。主要是实现化学反应、分析化验、研究试验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品。一般按用途分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。

标签

标签（label），是对事物所额外加上的识别用资讯纸卡或牌子。早在1700年，欧洲印制出了用在药品和布匹上作为商品识别的第一批标签。所以，现在的标签是用来，标志产品目标和分类或内容的，像是给目标确定的关键字词，便于自己和他人查找定位自己目标的工具。印刷业所称的标签，大部分是用来标识自己产品的相关说明的印刷品，并且大部分都是以背面自带胶的，但也有一些印刷时不带胶的，也可称为标签，而有胶的标签就是通俗称的“不干胶标签”。仪器校准后的标签问题，这个是由国家统一规定的（或自己的省内规定）标签，标签能够明确的说明仪器被校准后的详细情况。

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