5×蛋白上样缓冲液怎么用 SDS上样缓冲液（5*）作用是什么

2020-12-04 07:48:23 来源：朵拉利品网

1, SDS上样缓冲液（5*）作用是什么

4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样。
4*上样缓冲液使用方法：
1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例（4倍稀释）来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
5*上样缓冲液使用方法：
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液（5X）。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2. 按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液（5X）的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液（5X）。
3. 100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
4. 冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5. 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

3, 5*上样缓冲液 中“5*”是什么意思啊？

4*和5*的上样缓冲液的区别就是加样的比例不一样。
4*上样缓冲液使用方法：
1、按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例（4倍稀释）来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
5*上样缓冲液使用方法：
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液（5X）。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液（5X）的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液（5X）。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

名词解释

缓冲液

缓冲液是一种能在加入少量酸或碱和水时大大降低pH变动幅度的溶液，弱酸及其盐的混合溶液（如HOAc与NaOAc），弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲液。 其作用是保持溶液PH值的稳定，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响。

蛋白

蛋白又名鸡子白，异名：鸡卵白(《别录》)，鸡子清(《食疗本草》)。来源：为雉科动物家鸡的蛋白。动物形态详鸡肉条。

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