福林酚试剂测定蛋白质含量福林酚试剂法测定蛋白质含量的方法？

2020-04-28 06:23:54 来源：朵拉利品网

1, 福林酚试剂法测定蛋白质含量的方法？

原理：蛋白质与福林酚试剂反应，生成深蓝色复合物。蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照，而确定蛋白质含量。
操作方法：1、标准曲线的制作：分别吸取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml标准溶液于小试管中，分别加进不同量的蒸馏水，补足到1ml。各加入5ml试剂甲，混匀后于室温下（25℃左右）放置10min。再加入0.5ml试剂乙，立即混匀，于室温下反应30min。于500nm波长下测定光密度。以吸光值作为纵坐标，蛋白质含量为横坐标绘制标准曲线。
2、样品蛋白质含量的测定
取1ml样品溶液，加入5ml试剂甲，混匀，于25℃左右放置10min。再加入0.5ml试剂乙，立即摇匀，于25℃左右反应30min，测定吸光值，从标准曲线查出样品蛋白质含量。
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2, 为什么蛋白质含量测定中的福林

福林试剂里面有钨酸钠、钼酸钠、磷酸、浓盐酸、硫酸锂、溴水。
对比蛋白测定与蛋白酶活力测定用福林酚试剂配制方法（国标），发现两者的区别为硫酸锂的添加量前者为150g后者为50g，只知道福林酚试剂能够被酪氨酸等的酚基还原，产生钨蓝和钼蓝，详细原理不清楚。
所以不知道硫酸锂的作用，也就不知道在购买福林酚试剂（测蛋白酶）时，有没有必要非得特意的买用于测蛋白酶活力的，百度一下，只有一家公司标出了用于蛋白酶活力测定。
特别是硫酸锂的作用。

名词解释

硫酸锂

　　硫酸锂又名谷氨酸锂。无色单斜晶体或白色结晶状粉末，溶于水，不溶于丙酮和无水乙醇。25度时的水溶解度为25.7%。有α、β、γ三种晶型。α型为白色单斜结晶，β型是六方结晶，γ型立方结晶。有吸湿性。由浓水溶液中结晶出的一水合硫酸锂十分稳定。有治疗躁狂抑郁性精神病的作用。　　

福林

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蛋白酶

蛋白酶（外文名：bacillopeptidaseb）广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。