溴甲酚紫指示剂怎么配 0.04%溴甲酚紫指示液如何配制？

2020-04-24 12:44:19 来源：朵拉利品网

1, 0.04%溴甲酚紫指示液如何配制？

1%的溴酚蓝
将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。
0.05%的溴酚蓝
配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法：
0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围pH2.8~4.6（黄→蓝绿）。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。
1%溴酚蓝
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。

2, 如何配溴酚蓝指示剂？

0.1%溴甲酚绿：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇稀释至100ml;0.2%甲基红：称取0.2g甲基红，溶于95%乙醇稀释至100ml。按比例3:1 混合。
50ML的2g/L溴甲酚绿95%乙醇溶液与10mL的2g/L甲基红95%溶液混合。
0.5g溴甲酚绿95%乙醇溶液与0.1g甲基红95%溶液等体积混合。
一般按第一种配。试验的时候可以看下具体试剂要求，按什么方法配制的，或者按照标准GB/T 602配制！

名词解释

溴甲酚绿

溴甲酚绿[1]是细胞染色剂。指示剂，pH=3.8时呈黄色，pH=5.4时呈蓝绿色，pH=4.5时开始有颜色的明显变化。

甲基

甲基（methyl group），甲烷分子中去掉一个氢原子后剩下的电中性的一价基团。由碳和氢元素组成。甲基作为一个化学基团（-CH3），它能够结合在DNA上某些特定部位，这个甲基和DNA结合过程叫甲基化，相反，甲基从DNA上脱落的过程就叫做去甲基化。

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