核酸分子杂交种类论述核酸分子杂交技术原理？

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2019-06-28 18:06:49 来源：朵拉利品网

1, 论述核酸分子杂交技术原理？

核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。
它的基本原理是：互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链，即能够进行杂交。这种结合是特异的，即严格按照碱基互补的原则进行，它不仅能在DNA和DNA之间进行，也能在DNA和RNA之间进行。因此，当用一段已知基因的核酸序列作出探针，与变性后的单链基因组DNA接触时，如果两者的碱基完全配对，它们即互补地结合成双链，从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。
由此可见，进行基因检测有两个必要条件
一是必需的特异的DNA探针；二是必需的基因组DNA
当两者都变性呈单链状态时，就能进行分子杂交

2, 核酸分子杂交的主要实验方法有哪些？主要用途是什么

核酸分子杂交的主要实验方法和主要用途分述如下：
一、方法：核酸分子杂交的主要实验方法有：膜上杂交和原位杂交
杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA，也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交，即细胞原位杂交。探针必须经过标记，以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素，但由于同位素的安全性，近年来发展了许多非同位素标记探针的方法。
二、应用：
核酸分子杂交作为一项基本技术，已应用于核酸结构与功能研究的各个方面。核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性，因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用，而且在临床诊断上的应用也日趋增多。
在医学上，目前已用于多种遗传性疾病的基因诊断（gene diagnosis），恶性肿瘤的基因分析，传染病病原体的检测等领域中，其成果大大促进了现代医学的进步和发展。
基因工程第三步目的基因的鉴定中
1.鉴定目的基因是否整合到染色体DNA上：DNA-DNA分子杂交
2.鉴定目的基因是否准确表达蛋白质：RNA-DNA分子杂交或抗原-抗体杂交。
注：其中DNA-DNA分子杂交与RNA-DNA分子杂交属于核酸分子杂交。