安捷伦液相色谱仪操作 安捷伦高效液相的详细操作步骤

2019-06-26 21:08:58 来源：朵拉利品网

1, 安捷伦高效液相的详细操作步骤

自己的操作步骤，不是很规范，希望能帮到你
1、开机，先开仪器，后开电脑及操作软件。
2、纯甲醇冲洗柱子（甲醇需过滤膜并超声脱气）。
3、设置ABCD各相的比例，平衡流动相，至基线平稳。
4、设置进样量，瓶号，流速等，进样。
5、跑图。
6、进下一针
7、实验完毕，95%甲醇-5%水冲洗柱子30-60min，纯甲醇冲洗柱子30-60min，至基线平稳。
8、软件关闭泵，进样器等；关闭操作软件；关闭仪器各个开关；关电脑

2, 高效液相色谱仪的工作原理？

高效液相色谱仪工作原理；高压泵将贮液罐的流动相经进样器送入色谱柱中，然后从检测器的出口流出，这时整个系统就被流动相充满。当欲分离样品从进样器进入时，流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离，分离后不同组分依先后顺序进入检测器，记录仪将进入检测器的信号记录下来，得到液相色谱图。
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送，色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万），同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
高效液相色谱仪配置高压二元泵或者低压四元泵，而泵的冲程体积以及混合器的体积大小，均会对色谱基线噪音水平产生影响，特别是在梯度洗脱的时候。一般地泵的冲程体积越小以及混合器的体积相对越大，由输液造成的脉冲相对越小，对于梯度变化的响应能力越高，基线越平缓，
在应用二元泵的时，需要注意的是，当二元混合中的其中一元流动相的比例小于5%的时候，特别是在使用正相等度洗脱对一些医药中间体及终产品进行手性拆分的时候，最好使用单泵预混合的方式。避免由于泵在低比例时泵液精度相对较差，而导致色谱基线出现冲程相关峰，
参考资料来源；百度百科--高效液相色谱仪

相关概念

甲醇

甲醇（Methanol，CH3OH）是结构最为简单的饱和一元醇，CAS号为67-56-1或170082-17-4，分子量为32.04，沸点为64.7℃。因在干馏木材中首次发现，故又称“木醇”或“木精”。是无色有酒精气味易挥发的液体。人口服中毒最低剂量约为100mg/kg体重，经口摄入0.3～1g/kg可致死。用于制造甲醛和农药等，并用作有机物的萃取剂和酒精的变性剂等。成品通常由一氧化碳与氢气反应制得。

冲洗

冲洗滤池时，单位层冲洗一次所耗用时间内通过的水量。其计量通常以L/(m2.s)表示。

柱子

柱是建筑物中垂直的主结构件，承托在它上方物件的重量。在中国木建筑中，横梁直柱，柱阵列负责承托梁架结构及其他部分的重量，如屋檐，在主柱与地基间，常建有柱础。另外，亦有其他较小的柱，不置于地基之上，而是置于梁架上，以承托上方物件的重量，再透过梁架结构，把重量传至主柱之上。例如脊瓜柱或蜀柱，是在梁架之上承托部分屋檐的重量。中国古代的柱子多数为木造，属于大木作范围；间有石柱。为防水、防潮，木柱下垫以石质柱础。

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