液相色谱仪 液相色谱仪是测量什么的？

2019-06-26 21:08:54 来源：朵拉利品网

1, 液相色谱仪是测量什么的？

液相色谱仪是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。
基本用途：
液相色谱仪对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。
使用范围：
应用于生物医学、环境化学、石油化工等部门。
系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内。
由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

2, 液相色谱仪的使用方法

液相色谱仪使用及维护
液相色谱仪使用时要非常的注意。
使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。
液相色谱柱使用注意：
卡套柱的安装（加预柱）
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见下图）
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片
4.将"子弹头"预柱放入卡套片内
5.将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧
6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
平衡色谱柱
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。
硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
如何平衡色谱柱？
平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡）
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。
注意：
在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
色谱柱的维护
1.使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）
2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围
3.避免流动相组成及极性的剧烈变化
4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中
6.压力升高是需要更换预柱的信号

3, 液相色谱仪的作用

色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。
一、色谱分离基本原理：
由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
二、色谱分类方法：
色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
从两相的状态分类：
色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱
希望这些能对你有帮助。。

4, 液相色谱仪哪个牌子的比较好

岛津、安捷伦和Waters
个人认为前两者比较普遍。岛津价格比较低，而且很耐用，一般保养得很好，除了消耗的配件更换之外，仪器用个十几二十年是很常见的事情。一般工厂用岛津比较多。
安捷伦价格高一点，但是工作站认证做的比较好。就是说不能破解，不能在色谱图和时间上作假。研发企业用的比较多。
Waters国家研究机构用的比较多，不好多做评价。
这些仪器如果购买应该都会有培训。一次是工程师上门安装的时候教授实验员的简单操作，另一次免费的培训是赠送的比较全面的培训，时间大概两三天的样子。
最好不建议国产品牌或者一些杂牌子。售后服务、培训、修理以及日常操作都是各种各样的问题。仪器毕竟是要常用的，最好还是好一点的品牌。

6, 液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些？！

高效液相色谱仪操作步骤： 1）.过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。 2）.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3）.打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。 4）.进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 5）.有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min。 6）.调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。
7）.设计走样方法。点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new method。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。 8）.进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。 9）.关机时，先关计算机，再关液相色谱。 10）.填写登记本，由负责人签字。
高效液相色谱仪使用注意事项：
1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的（只有更换色谱柱），如果正常情况下压力突然降低有可能是（1）接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即可。如果没有漏液则可能是（2）白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去，采取的方法是排气泡排气时：先STOP停泵—打开排气阀—按PURGE（快冲）键—等气泡排完后先STOP停泵—拧紧排气阀，其先后步骤不要搞反了。
2、泵正常工作时最高压力最好不要超过200KG，所以打开泵以后可以将泵的最大压力调到200KG，这样如果压力超过上限则会自动报警停机，流速最好不用超过1ML/MIN，如果使用时压力超过200KG，建议将流速调低点以降低压力（在色谱柱正常的情况下），如果是因为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换色谱柱（因为色谱属于耗材长时间使用就需要更换，更换的主要依据色谱柱出峰不正常或者柱压力过高）。 3、泵正常工作时平均每15天左右向注油孔加润滑油2~3滴。 4、流动相里面如果有盐或酸类，做完实验后要先用95%二次蒸馏水与5%甲醇洗色谱柱40分钟左右，然后用纯甲醇洗30分钟左右才可以关机。第二天如果继续做实验流动相里面仍旧有盐或酸类，最好先用95%二次蒸馏水与5%甲醇过度20分钟，再用流动相。如果流动相里面只有甲醇，水，乙腈。做完实验后就不用95%二次蒸馏水5%甲醇冲洗，可直接用纯甲醇洗30分钟即可关机。 5、C18色谱柱的耐酸PH值范围3—8使用时不要超出。 6、仪器长期不用时一定要将滤头泡在甲醇里半月开机一次，如果开机时泵抽不上液可以打开排气阀按PURGE快冲。 7、调反压器时要注意等液体流出来以后才能调一般调8—10KG，比如现在泵显示屏显示柱压50KG那再增加10KG显示屏上显示柱压60KG然后拧紧锁紧螺母。 8、色谱仪关机顺序：清洗液路时可以把检测器直接关机，清洗结束后先按STOP让泵停止后在关电源不允许直接关机。

相关概念

液相色谱仪

利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。

系统

　　体系，汉语词语，泛指一定范围内或同类的事物按照一定的秩序和内部联系组合而成的整体，是不同系统组成的系统。自然界的体系遵循自然的法则，而人类社会的体系则要复杂得多。影响这个体系的因素除人性的自然发展之外，还有人类社会对自身认识的发展。

色谱

色谱（英语：Chromatography）是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。色谱法起源于20世纪初，1950年代之后飞速发展，并发展出一个独立的三级学科——色谱学。

• 上一篇 液相色谱仪哪种好 液相色谱仪哪个牌子的比较好
• 下一篇 安捷伦液相色谱仪操作 安捷伦高效液相的详细操作步骤