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高效液相色谱仪检定国标 高效液相色谱仪中出现色谱峰重叠,这是怎么回事?
2019-06-26 21:06:28 来源:朵拉利品网

1, 高效液相色谱仪中出现色谱峰重叠,这是怎么回事?



由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相,本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
高效液相色谱仪由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统组成。其中LC-2010和Agilent1100型为单泵型,LC-20AB型为双泵型高效液相色谱仪。
2、验证目的
检查并确认高效液相色谱仪运行性能符合要求。
3、验证实施小组成员及有关责任
验证实施小组组长?负责协调及异常情况的处理;操作员?负责验证的具体操作工作;QA?负责监督实施本方案。
4、主要验证文件
高效液相色谱法(SOP-ZL-?)、
中华人民共和国国家计量检定规程 液相色谱仪(JJG705-2002)、
UV-VIS检测器SPD-20A/SPD-20AV说明书、
溶液传输单元LC-20AB说明书、
中华人民共和国药典2005年版二部、

2, 高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数?



色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数
前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;
分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)
Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间,W1 W2 分别表示 两峰的底峰宽,分离度R≥1.5 表示两峰完全分开。
拖尾因子:表示色谱峰的对称程度 T(拖尾因子)=W0.05h/2d1
W0.05h为5%峰高处的峰宽,d1为峰顶点至峰前沿之间的距离
《中国药典》规定峰高法定量时T应该在0.95-1.05之间,低于0.95为前延峰,高于1.05为拖尾峰。

理论塔板数(theoretical plate number),用于定量表示色谱柱的分离效率
理论塔板数=5.54*(Rt/W0.5)^2 Rt 为保留时间 W0.5为半峰宽
也可以表示为:N=16*(t/w )^2。其中,t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间,w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。

相关概念


液相色谱仪

利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。

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验证(拼音:yàn zhèng),动词,指经过检验得到证实。出自,汉·王充《论衡·奇怪》:“言之有头足,故人信其说;明事以验证,故人然其文”。

LC

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