液相色谱 液相色谱的用途是什么？

2019-06-26 21:05:47 来源：朵拉利品网

1, 液相色谱的用途是什么？

高效液相色谱应用很广泛，基本能对有机化合物中百分之七十到百分之八十的化合物进行分离与检测，下面以安捷伦液相色谱技术做为举例：
应用
液相色谱用途广泛，已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。安捷伦液相色谱和液-质联用系统正为各种客户群服务，如药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石油化工等市场。随着新应用和改进应用的开发，液相色谱的市场增长很快，包括制药和生命科学市场，中国和印度增长势头尤为强劲。
制药：制药行业是安捷伦液相色谱和液-质联用系统的主要用户。从药物研制到开发、制造和QA/QC，液相色谱在药物的整个生命周期中发挥着重要作用。它使得科学家能够迅速进行筛选、纯化的分析工作。液相色谱和液-质联用系统也是用来检查药物化合物质量和数量的主要工具，它在法规环境中使用固定方法，为药物制造提供支持。
蛋白质：液相色谱和液-质联用系统正在不断增长的一个市场机会是识别、隔离和净化细胞和体液中的蛋白质。液相色谱用途广泛，为分析蛋白质和其它生物分子提供了理想的技术，包括大的、非常灵敏、分析困难的蛋白质和生物分子。
环境：安捷伦的客户主要是重点满足和实施法规标准的政府实验室、工业实验室和独立实验室。液相色谱和液-质联用系统分析包括非挥发性杀虫剂、除草剂、多核芳香碳氢化合物及不适合气相色谱的其它化合物。
食品安全：食品安全分析包括检测农产品和食品中的添加剂、残留物、杂质和毒素，其主要重点是满足和实施法规标准。在全球贸易自由化、法规监管环境不断完善及食品安全问题的公众意识不断提高的情况下，食品分析需求正在迅速增长。
法律医学：安捷伦科技是用于药物筛选和毒理学研究的气相色谱/质谱仪系统的全球领导型供应商。作为气相色谱/质谱设备的补充，安捷伦的液相色谱/质谱系统已开始被应用于法医分析。电感耦合离子质谱与激光切除的结合对于法医调查中固体样品以及基本元素图谱的测量也非常有效。
国土安全：安捷伦长期以来一直与美国和国际政府、军事、司法和卫生机构合作，检测、识别、确认和消除生物和化学战争制剂及有毒的工业化合物。
石油化工（HPI）：液相色谱应用包括添加剂化验、精细和专用化学分析以及使用带有有机溶剂或水性溶剂的大小排查色谱检定聚合物。
半导体：安捷伦为半导体制造过程中超高纯度材料的分析提供了的创新型和高可靠型电感耦合离子质谱仪。电感耦合离子质谱仪的主要应用包括半导体制造过程中散装和过程化学品的特性分析、硅片表面有机及金属污染物分析、最终部件（磁盘驱动器，电路板等）制造过程中挥发性有机溶剂的分析。

2, 高效液相色谱法的计算公式

测定方法 定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时，须采用峰面积法。
面积归一化法
测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定，除另有规定外，可为该品种项下主成分保留时间的倍数。
主成分自身对照法
当杂质峰面积与成分峰面积相差悬殊时，采用主成分自身对照法。在测定前，先按各品种项下规定的杂质限度，将供试品稀释成一定浓度的溶液作为对照溶液，进样，调节检测器的灵敏度或进样量，使对照溶液中的主成分色谱峰面积满足准确测量要求。然后取供试品溶液，进样，记录时间，除另有规定外，应为主成分保留时间的倍数。根据测得的供试品溶液的各杂质峰面积及其总和并和对照溶液主成分的峰面积比较，计算杂质限度。
内标法
测定供试品中杂质的总量限度
采用不加校正因子的峰面积法。取供试品，按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图I；再配制含有内标物质的供试品溶液，在同样的条件下注样，记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外，应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数，色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上，否则应调整注样量或检测器灵敏度。
如果色谱图Ⅰ中没有与色谱图Ⅱ上内标峰保留时间相同的杂质峰，则色谱图Ⅱ中各杂质峰面积之和应小于内标物质峰面积（溶剂峰不计在内）。如果色谱图Ⅰ中有与色谱图Ⅱ上内标物质峰保留时间相同的杂质峰，应将色谱图Ⅱ上的内标物质峰面积减去色谱图Ⅰ中此杂质峰面积，即为内标物质峰的校正面积；色谱图Ⅱ中各杂质峰总面积加色谱图Ⅰ中此杂峰面积，即为各杂质峰的校正总面积，各杂质峰的校正总面积应小于内标物质峰的校正面积。
加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量
按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液，取一定量注入仪器，记录色谱图，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子：
As/ms]校正因子f=- Ar/mr 式中 As为内标物质的峰面积或峰高，Ar为对照品的峰面积或峰高； ms为加入内标物质的量，mr为加入对照品的量。 再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品（或其杂质）峰和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量：Ax 含量（mx）=f*-As/ms 式中 Ax为供试品（或其杂质）峰面积或峰高； mx为供试品（或其杂质）的量。 f、As和ms的意义同上。
当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液使用同一份内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。
外标法
测定供试品中某个杂质或主成分含量
按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量：
A含量（mx）=mr*-Ar式中各符号意义同上
由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时，以定量环进样为好。

3, 液相色谱的数据代表什么意思

液相色谱有两个重要的数据：保留时间和峰面积。其实色谱图就是一张横轴是保留时间，纵轴是峰面积的图谱。
比如这张图，进样分析后发现4.0133min的色谱峰是土霉素，9.7437min的色谱峰是金霉素。那么按照这样的方法测定，4min左右的色谱峰就都可以默认为是土霉素，9.7min左右的色谱峰就都是金霉素了。
峰面积，测量参数，是计算含量时的重要数据。同一种物质，浓度和峰面积成正比。也就是所谓的线性关系。
假如我配置了一个浓度是1mg/ml的土霉素标准溶液，然后进样分析，测得土霉素的峰面积是100的话。那么我测定另外一个未知物质，该物质4min出峰，峰面积是1000，就可以默认为未知物质是土霉素，浓度时10mg/ml。
除此之外液相还有一些其他的参数，比如常见的分离度和理论塔板数。
分离度：是判断物质分离情况的一个参数，通常认为分离度大于1.5，两个色谱峰算是分开了。
理论塔板数：表示色谱柱的柱效的参数。除另有规定外，色谱峰的理论板数不得低于2000.

相关概念

内标

内标即内部标准之意，指在定量分析中添加于检材内的一种适 当的化合物纯品，其测得值是计算被测组分 含量的参比依据。在毒（药）物分析中，为 了保证操作符合检测方法的要求，常常选择 一种适当的化合物纯品作为随行参比物，添加已知量于检材中，跟随被测组分-起进行 前处理，最后同时分别检测被测组分和参比物，根据参比物的回收情况判断前处理过程的效率及仪器等检测条件是否正常。若发现 参比物回收率过低或已失踪，则说明检测过 程存在失误。当参比物的测得值用于定量计 算时则称为内标，所用方法称为内标法。

杂质

一种物质中所夹杂的不纯成分，它们的形态有固体颗粒状、纤维状、软质胶状、液状、气状。一般我们将杂质含量不超过0.03%的液体视为无杂质

色谱

色谱（英语：Chromatography）是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。色谱法起源于20世纪初，1950年代之后飞速发展，并发展出一个独立的三级学科——色谱学。

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